热点资讯
物联网软件开发公司 嘌呤霉素（puromycin）抗体检测卵白合成和翻译防止的旨趣和措施
发布日期：2024-11-03 09:05 点击次数：135
嘌呤霉素防止卵白合成的旨趣：
嘌呤霉素（puromycin）和氨酰-tRNA分子3'结尾的结构肖似，八成与核糖体的A位点和谐，从而被添加到新合成的肽链中去。puromycin和核糖体的A位点和谐然后掺入延长的肽链之后，则无法继续参与随后的肽链延长反馈，导致卵白质合成的提前圮绝，然后开释出C-结尾含有嘌呤霉素的不熟练的多肽（如下图红色部分所示）。因此，向细胞中添加puromycin会防止细胞内悉数的卵白质合成。
图片
嘌呤霉素防止卵白合成旨趣（图片开始于www.cellco.com）
含有puromycin的不熟练的多肽不错被针对puromycin的抗体识别，因此不错通过WB或者IFA检测细胞内总的卵白质合成情况，或者翻译防止情况。
软件开发puromycin抗体检测卵白翻译防止案例详解：
（1）puromycin抗体WB法
如下图所示，作家用鼠诺如病毒（murine norovirus，MNV）感染骨髓开始的巨噬细胞，差异于感染后的3h、6h、9h、12h和15h收样，每次收样前用10 ug/ml的puromycin惩办20min，方向是让puromycin掺入到新和成的多肽中去，然后就能用puromycin的抗体检测新和成的多肽了。成果显露，跟着感染时间延长，puromycin抗体八成检测到的卵白含量安宁裁减，诠释新和成的卵白减少了，也便是诠释注解MNV感染防止了卵白翻译。
图片
鼠诺如病毒感染防止宿主卵白翻译（Svenja Fritzlar et al. 2019. mBio）
（2）puromycin抗体IFA法
puromycin的抗体除了不错作念WB，也不错通过作念IFA来检测细胞卵白翻译防止。作家相通是用MNV感染，差异于感染后的6h、9h和12h固定细胞，固定前用10 ug/ml的puromycin惩办30min。
如下图所示，anti-puromycin检测的是新和成的多肽，anti-VPg标志被MNV感染的阳性细胞。尤其是MNV感染12hpi时，MNV阳性的细胞（红色）中puromycin的信号裁减，物联网app开发诠释MNV感染的细胞中卵白翻译被防止。
图片
鼠诺如病毒感染防止宿主卵白翻译（Svenja Fritzlar et al. 2019. mBio）
puromycin抗体筛选卵白翻译防止因子：
为了筛选MNV编码的卵白翻译防止因子，作家将MNV编码的基因转染到HEK-293T细胞中，用10 ug/ml的puromycin惩办20min，收样WB用puromycin抗体检测卵白翻译情况，成果显露NS3八成防止宿主卵白翻译。
亚军玛丽娅-埃尔南德斯（Maria Hernandez）来自西班牙，获得10.8分，世界排名从251位上升到188位。
图片
相通的，将MNV编码的基因转染到Vero细胞中，用10 ug/ml的puromycin惩办30min，然后用puromycin抗体染色检测卵白翻译情况，成果显露NS3八成防止宿主卵白翻译，因为NS3阳性细胞（红色）中puromycin信号（绿色）是裁减的。
图片
刚入坑的家东谈主，不知谈何如盘考一个卵白质的功能的，或者念念学基础常识的，不错购买下方相接的《功能卵白质盘考》。小编其时买的价钱是126,这本书知谈的少，卖的不好，库存少，价钱可能会有几块钱的高下浮动。整本书简略430页，目次齐占了7页，本色终点全。小编本硕博沿途齐看这本书物联网软件开发公司，相等过劲。
若是你合计灵验的话，就帮手点个「赞」和「再看」吧。 本站仅提供存储处事，悉数本色均由用户发布，如发现存害或侵权本色，请点击举报。